Back to Explorer

식품공전 미생물 시험법 해설서

식품, 미생물민원인안내서pdf2025-02-25
양성구획의 판정순수분리미생물 시험법무균적생화학 시험운동성Negative controlPositive control양성대조군음성대조군확인시험표준균주순수 분리β-D-galactosidaseOrnithine decarboxylaseArginine dihydrolase순수배양무균적으로미생물 허용기준무균시험

Key Topics

Terms and concepts identified from this document

Scope & Applicability

Product Classes

15
낙농제품

VRBA 배지를 사용하여 대장균군을 검출하는 대상

향신료조제품

곰팡이수 시험법 적용 대상 식품

천연향신료

곰팡이수 시험법 적용 대상 식품

패류

지침서 내 원료 분류

크로노박터(Cronobacter spp.)

시험 대상 미생물

크로노박터

Enterobacteriaceae과에 속하는 그람 음성균

캠필로박터 제주니/콜리

식품 내 주요 식중독균 분류

육류

Column 추출법의 대상 검체

여시니아 엔테로콜리티카

장내세균과에 속하는 인수공통 전염병 원인체

장출혈성대장균

최종 판정 대상 미생물; 시가독소 유전자가 확인되고 대장균으로 동정된 경우의 판정 결과

장출혈성 대장균

시험 대상이 되는 병원성 미생물 분류

수산물

식품원료 분류 및 오염물질 관리 대상

가공식품

영양성분 표시제도의 적용 대상; 영양표시를 해야 하는 대상식품의 기준

장염비브리오

시험 대상 미생물 (Vibrio parahaemolyticus)

어패류

시험 대상 식품 매질; 동태, 고등어 등을 포함하는 분석 대상 매질

Stakeholders

1
제조사

제품 적합성 및 프로세스 위임에 대한 책임 주체; MDSAP 수검 및 QMS 범위 관리 주체

Device Components

5
하워드곰팡이계수슬라이드

곰팡이 계수를 위해 검체를 점적하는 특수 슬라이드; 곰팡이수 측정을 위해 검체를 도포하는 전용 슬라이드

하워드곰팡이계수슬라이드(Howard Mold Counting slide)

곰팡이 계수를 위해 특수 제작된 0.1 mm 깊이의 유리 슬라이드

듀람관

시험관 내에서 가스 발생을 확인하기 위해 사용되는 도구

대물측미계

현미경을 사용하여 미생물의 크기를 측정하기 위한 도구

유침대물렌즈

현미경의 해상도를 높이기 위해 유침유를 사용하는 고배율 렌즈

Regulatory Context

Regulatory Activities

7
재시험

대조군 결과 부적합 시 조치사항

결과 및 보고

장염비브리오 최종 판정 기준

적부판정

식품에서 오염물질 검출 시 수행하는 규제 활동; 실험치와 규격치를 비교하여 적합 여부를 판정하는 활동

확인시험

품목의 정체성을 확인하는 시험

정량시험

균수 산출을 위한 시험; 검체 내의 균수를 측정하는 시험; 바실루스 세레우스의 균수를 측정하는 규제 활동

정성시험

음성 규격 확인을 위한 시험

제·개정

지침 및 안내서의 관리 활동

Document Types

7
Carbohydrate utilization broth 조성 및 조제

탄수화물 발효능 시험에 사용되는 배지의 성분 및 제조 방법

cooked meat 배지

배지 33, 증균배양에 사용되는 배지

GAM 배지

배지 34, 혐기성 균의 배양과 분리를 위한 반고체 배지

TSC 한천배지

배지 41, Tryptose-Sulfite-Cycloserine Agar

클로스트리디움 퍼프린젠스 한천배지

배지 27, 분리배양에 사용되는 배지

식품공전

식품 미생물 시험의 표준 근거 문서; 대한민국 식품의 기준 및 규격

최확수표

양성 발효관 수에 따른 MPN 값을 확인하는 표

Attributes

15
반투명한 흰색집락

캠필로박터제주니/콜리의 배양 특성

내염성

NaCl 7.5% 함유 배지에서도 증식하는 특성

무아포 구균

황색포도상구균의 형태적 특징

통성 혐기성

황색포도상구균의 산소 요구성

25℃

진균 배양 온도 조건

35~37℃

유산균 배양 온도 조건

양성비율

검경한 총 가시구획수 대비 양성 가시구획의 백분율

양성 비율 %

50개 가시구획 검경 후 산출하는 최종 결과값

분절

격벽에 의해 나누어진 곰팡이 균사의 형태적 특성

세포벽의 평행

곰팡이 균사를 식별하는 가장 유용한 특징

양성비율%

50개 가시구획 중 곰팡이 균사가 발견된 구획의 비율

운동성

V. vulnificus의 생물학적 특성

L-ornithine decarboxylase 양성

Cronobacter spp.의 생화학적 특성

L-arginine dihydrolase 양성

Cronobacter spp.의 생화학적 특성

L-lysine decarboxylase 음성

Cronobacter spp.의 생화학적 특성

Regulatory Terms

1
Pooling 법

검체를 섞어서 시험하는 방법으로 크로노박터 시험에서는 권장되지 않음

Technical Details

Substances

15
ferrous sulphate

산소 민감 균 분리를 위한 성분

Charcoal

hydrogen peroxide를 제거하여 균 분리 지원

Cycloheximide

항진균제 역할

Cefoperazone

Pseudomonas와 Enterobacteriaceae의 성장을 억제하여 배지에 선택성 부여

Sodium pyruvate

광화학적으로 생성되는 hydrogen peroxide를 제거하여 산소에 민감한 균 분리 지원

lysed horse blood

캠필로박터의 선택적 분리능과 균의 성장을 촉진하는 역할

시가독소 유전자

장출혈성 대장균 판정의 핵심 지표

5-bromo-4-chloro-3 indolyl β-D-glucuronide

β-glucuronidase 효소 검출을 위한 기질

sorbitol

Active ingredient in Microlax Enema

tellurite

non-O157 E. coli 등을 억제하기 위해 배지에 첨가

cefixime

Proteus spp.를 억제하기 위해 배지에 첨가

TC-SMAC 한천배지

Tellurite Cefixime-Sorbitol MacConkey Agar, 배지 66

novobiocin

mTSB 배지에 선택성을 부여하는 항생제

mTSB 배지

Modified Tryptone Soya Broth, 배지 74

phosphatidylinositol

L. monocytogenes의 phospholipase에 의해 가수분해되는 성분

Testing Methods

15
Modified Campy Blood Free 한천배지

혈액 없이 캠필로박터 제주니/콜리를 분리하는 배지 48

Preston 한천배지

세균 성장에 필요한 영양소 및 선택제 포함 배지 75

Bolton 배지

캠필로박터 분리를 위한 배지 68

배양법

미생물을 배지에서 키워 확인하는 방법

대장균 시험법

일반 대장균 확인을 위한 시험 방법

PCR 스크리닝 시험법

장출혈성 대장균 확인을 위한 유전자 증폭 시험

ALOA 한천배지

Ottaviani and Agosti에 따른 리스테리아 분리 배지

LPM 한천배지

그람 양성구균과 그람 음성 간균 억제 및 리스테리아 선택 배지

Oxford 한천배지

리스테리아 판별을 위한 배지 성분 및 원리 설명

DNase 생성능

핵산분해효소 생성 여부 확인

coagulase

혈장응고 작용 확인 시험

Catalase

황색포도상구균 확인을 위한 효소 시험

Desoxycholate Citrate 한천배지

Salmonella 와 Shigella 분리에 사용되는 배지

Bismuth Sulfite 한천배지

Salmonella, 특히 Salmonella Typhi을 분리하기 위한 선택성 배지

BG Sulfa 한천배지

Salmonella 종의 선택적 분리를 위해 사용되는 배지

Processes

15
순수분리

유전자 확인 후 균을 분리하는 공정

표준평판법

일반세균수 시험에 준하여 실시하는 배양법

시험용액 조제

검체 5 g을 평량하여 균질화하고 안정액과 혼합하는 과정

현미경 검경

하워드 슬라이드를 이용하여 곰팡이 균사를 관찰하고 판정하는 과정; 하워드 곰팡이 계수법의 핵심 분석 단계

균수 계산

시험 결과에 따른 최종 수치 산출 공정

신장(extension)

PCR 반응 단계; DNA 사슬이 연장되는 단계; DNA 중합효소에 의한 서열 연장 단계; PCR 반응 단계별 조건; PCR 사이클 내 유전자 신장 단계; DNA 중합효소에 의해 새로운 가닥이 합성되는 단계; PCR 반응 조건 단계

결합(annealing)

PCR 반응 단계; 프라이머가 DNA에 결합하는 단계; 프라이머가 주형 DNA에 결합하는 PCR 단계; PCR 반응 단계별 조건; PCR 사이클 내 프라이머 결합 단계; 프라이머가 표적 DNA에 결합하는 단계 (50°C); PCR 반응 조건 단계

초기변성(initial denaturation)

Real-time PCR 반응 단계

유전자 증폭

종 특이 프라이머를 이용한 PCR 과정; PCR을 통한 특정 유전자 구간 복제 과정; 추출된 DNA를 이용한 후속 공정; 식품 중 사용원료 진위 판별을 위한 유전자 분석 방법

균수 측정

검체 내 미생물 농도 정량 분석

혐기 배양

35~37°C에서 24±2시간 동안 산소 없이 배양

균수측정

정량시험의 첫 번째 단계

정성시험

키트를 이용한 초기 검사 단계

정량시험

시험법의 정량적 분석 단계

균수계산

확인 동정된 균수에 희석배수를 곱하여 계산하는 과정; 최종 균수를 산출하는 단계

Clinical Concepts

7
패혈증

제품 이식의 금기사항

캠필로박터 제주니/콜리

시험 대상이 되는 주요 식중독균

리스테리아증

리스테리아균 감염에 의한 질환

그람 양성

클로스트리디움 퍼프린젠스의 형태학적 특성

C. perfringens

시험 대상이 되는 미생물(클로스트리디움 퍼프린젠스)

그람음성, 무아포성 간균

완전시험에서 증명되어야 하는 미생물 특성

대장균군

미생물 시험 항목

Identified Hazards

Hazards

15
화농성염증

황색포도상구균 감염 시 유발되는 증상

그람 음성균

MacConkey 배지를 통해 검출하고자 하는 대상

대장균군

배지를 통해 검출 및 계수하고자 하는 미생물 집단

곰팡이 균사

식품 내 오염 지표로 확인되는 미생물 구조체; 현미경을 통해 진단하고 계수하는 대상

콜레라 독소(cholerae-toxin)

비브리오 콜레라가 생성하여 위장염을 일으키는 독소

크로노박터(Cronobacter spp.)

시험 대상이 되는 식중독균

뇌막염

크로노박터 감염으로 인한 위해

패혈증

기증자 부적격 사유가 될 수 있는 질환; Sepsis as a donor exclusion criterion; 활성전신감염증(예, 패혈증, 바이러스혈증 등); 기타 조직에 대해 위해평가를 실시해야 하는 원인; 전신성 감염 및 염증반응 증후군

에어로졸

고농도의 생물위해 에어로졸이 발생하는 경우; 원심분리 및 혼합과정에서 생성되어 교차오염을 유발할 수 있는 요소; 병원체 유출 및 오염의 주요 원인; 병원체 취급자의 주요 감염 매개체; 실험자 감염 경로 및 보호구 착용 사유; 병원체 배양 또는 공정에서 발생하는 고농도의 생물 위해 물질; 유출물로부터 발생하여 확산될 수 있는 위해 요소; 유출물로부터 발생하여 확산될 수 있는 공기 중 입자; 병원체 유출 시 발생하여 확산될 수 있는 위해 요소; 유출물 처리 시 발생 및 확산 주의가 필요한 물질 상태; 유출물 처리 과정에서 발생 및 확산을 방지해야 하는 요소; 유출 사고 시 발생하여 확산될 수 있는 위해 요소; 유출물로부터 발생하는 감염성 공기 입자; 폐수 유출 시 발생 및 확산을 방지해야 하는 대상; 유출물로부터 발생하여 공기 중 감염을 일으킬 수 있는 미세 입자

대장균 O157:H7

확정 시험의 대상이 되는 특정 혈청형

장출혈성 대장균(Enterohaemorrhagic Escherichia coli)

시험법의 대상이 되는 식중독균

병원성

미생물 공여체의 안전성 확인 항목; 공여체 및 근연종의 식품위해 관련 정보; 공여체 및 근연종의 위해성 정보

식중독

음식물 이동배식 및 재사용 시 발생 우려 위험

장염비브리오(Vibrio parahaemolyticus)

수산물 섭취 시 발생하는 식중독균

중독 위험

Potassium cyanide 취급 시 주의사항

Standards & References

External Standards

10
AOAC International

Howard Mold Counting 시험법의 출처 기관

ATCC 6939

Rhodococcus equi 표준균주 번호

ATCC 25923

Staphylococcus aureus 표준균주 번호

BAM

부가시험 시 따르는 국제 공인 시험방법; 부가시험 시 참고하는 국제 공인 시험방법; FDA 미생물 분석 매뉴얼

AOAC

원심분리 조건 및 시험법의 기준이 되는 외부 표준; 신속 검체조제법에서 요구하는 최소 원심력 및 시간 기준 제공; 신속 검체조제법의 근간이 되는 국제 분석 화학자 협회 표준; 미국공식분석화학회 분석법; 추출 용매의 표준적 사용 근거 표준

BAM Chapter 18

FDA의 효모, 곰팡이 및 마이코톡신 시험법 참조

배지 71

대장균 건조필름배지 II의 표준 번호

배지 55

대장균 건조필름배지 I의 표준 번호

식품공전

영양성분별로 사용해야 하는 분석방법의 기준

AOAC OMA

국제적으로 공인된 분석 방법 등급; 국제적으로 공인된 시험 방법 등급

ISO Standards

15
ISO 21872-1

식품 사슬의 미생물학 - 비브리오 속 판별을 위한 수평적 방법; Vibrio spp. 검출을 위한 국제 표준

ISO 22964

식품 연쇄의 미생물학 - Cronobacter spp. 검출을 위한 수평적 방법

ISO 10272-1

캠필로박터 검출 및 계수를 위한 수평적 방법

ISO 7932

Bacillus cereus 계수법에 관한 국제 표준

ISO/TS 18867:2015

PCR을 이용한 식중독균 검출 표준

ISO 10273:2017

Yersinia enterocolitica 검출을 위한 수평적 방법

ISO 16654:2001/Amd 2:2023

대장균 O157 검출을 위한 수평적 방법

ISO/TS 13136:2012(E)

식중독균 검출을 위한 Real-time PCR 기반 수평적 방법

ISO Shiga toxin-producing Escherichia coli(STEC) PCR 검사법

PCR 방법의 근거가 되는 국제 표준

ISO 11290-1

리스테리아 검출을 위한 국제 표준 방법

ISO 7937:2004

클로스트리디움 퍼프린젠스 수수 시험법 국제 표준

ISO 21872-1:2017

Vibrio spp. 검출을 위한 국제 표준 시험법

ISO

국제 표준화 기구 규격

ISO 6888-2

토끼 혈장 피브리노겐 한천배지를 이용한 황색포도상구균 계수법

ISO 6888-1

Baird-Parker 한천배지를 이용한 황색포도상구균 계수법

Specifications

14
10개~150개의 집락

집락수 계산을 위한 유효 평판 선택 기준

가시구획 직경의 1/6

양성구획으로 판정하기 위한 곰팡이 균사의 최소 길이 기준; 양성구획 판정을 위한 곰팡이 균사 총길이의 최소 기준

곤충독소단백질(toxin crystal)

B. thuringiensis 판정의 핵심 기준

규격치

불순물의 규격치 0.15% 초과 여부

n=5, c=2, m=0, M=10

고춧가루의 대장균 미생물 한도 규격

95%의 신뢰한계

최확수 산출의 통계적 신뢰 수준

최확수표

균수 산출을 위한 기준표; 검체 중 대장균수를 산출하기 위한 기준표

n=5, c=0, m=0

특수의료용도식품 대장균군 통계적 기준

15-300개

유효 plate의 colony 형성 범위

48±2시간

미생물 배양 시간 조건

35±1°C

미생물 배양 온도 조건

15~300개

계수 가능한 평판당 집락수 범위; 집락수 계산을 위한 유효 평판 기준; 평판배지법에서 집락수 계산에 적용되는 유효 집락 생성 범위

25 g(mL)

미생물검사용 시료의 원칙적 대상량

미생물 규격(n, c, m, M)

통계적 개념을 도입한 미생물 허용 기준

MFDS Specific

MFDS Organizations

5
미생물과

식품위해평가부 소속의 문의처

식품의약품안전처장
식품의약품안전평가원 미생물과

본 안내서에 대한 의견이나 문의사항을 담당하는 부서

식품의약품안전평가원

가이드라인 작성 및 검토 부서 소속 기관

식품의약품안전처

Organizations

5
국립수산과학원

수산물 한글 명칭 확인 기관

질병관리본부

임상연구정보서비스(CRIS) 운영 기관; 긴급 도입 의료기기 요청 기관

식품의약품안전처
USDA

돼지 유래 원료 처리 시설 관리 기관

FDA

유사제품 허가현황 참조 기관; 국외 유사 제품 허가 현황 비교 대상 기관

Activities

3
세척 및 건조

슬라이드 재사용 전 처리 과정

배양

한천 플레이트와 희석액을 (48 ± 2) 시간 동안 유지

검체의 채취

정제수 품질관리용 샘플링

Referenced Korean Laws (10)

  • 「식품공전」

    잔류농약 시험법의 기준이 되는 공정서; 시험법의 근거가 되는 법적 고시; 식품 분석을 위한 시험법의 근거; 식품공전 잔류농약 시험법 실무해설서; 식품공전 시험법 해설; 식품공전 시험법 해설 및 잔류농약 분석; 잔류농약 시험법의 근거 법령

  • 식중독 표준업무지침

    식약처 발행 참고 문헌

  • 「일반시험법」 8. 비소시험법

    비소 시험의 근거가 되는 공정서 규정; 비소 분석 시 참조하는 공정서 규정

  • 「건강기능식품공전」

    유산균수 및 유산간·구균 및 비피더스균 시험법의 근거 법령; 참고문헌

  • 「제8. 일반시험법 4. 미생물 시험법」

    식품공전 내 미생물 공통 시험 기준; 식품공전 내 미생물 공통 시험 규정

  • 식품의약품안전처 고시 제2024-46호

    우수화장품 제조 및 품질관리기준 최신 개정 고시

  • 「제7. 검체의 채취 및 취급방법」

    식품공전 내 참조 절; 식품공전 내 검체 취급 기준; 식품공전 내 검체 취급 규정

  • 「식품의약품안전처 고시 제 2024-71호」

    식품공전의 근거 법령 고시; 식품공전 미생물 시험법의 근거 법령; 식품공전 세균발육시험의 근거 고시; 식품공전의 근거가 되는 식약처 고시; 식품공전의 최신 고시 정보; 크로노박터 시험법의 근거 법령; 식품공전의 근거 고시

  • 식품의약품안전처 지침서등의 관리에 관한 규정

  • 「식품의 기준 및 규격」

    체중조절용 조제식품의 제조·가공 기준 및 영양성분 규격; 식품공전에 시험방법이 없는 경우 따르는 총칙; 저지방 표시조건 적용 기준

Related MFDS Guidelines (8)